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同型半胱氨酸(Homocysteine)检测试剂简介
更多相关文章    时间:2008/9/5 16:55:06,点击:0

孙卫兵(复星长征 上海    200433)

    同型半胱氨酸是一种含硫的氨基酸,在人体内并非为必需的氨基酸,主要是由蛋氨酸代谢过程中去甲基化所生成的中间产物之一。同型半胱氨酸再经甲基化路径合成蛋氨酸或经转硫路径代谢生成半胱氨酸。血浆中同型半胱氨酸以氧化型和还原型两种形式存在。其中以与蛋白质结合的氧化型为主要存在形式,约占80%。血浆中的同型半胱氨胺酸的浓度受到许多因素影响,其中包括遗传、营养的摄取,年龄,性别,生活习惯,疾病与药物等。

    许多研究发现同型半胱氨酸与心血管疾病及中风有密切的关系,体内高同型半胱氨酸浓度视作为心血管疾病的独立危险因子,它会造成血管内脾细胞的损伤而导致发炎,并刺激血管壁的细胞增生,进而造成血管的堵塞,增加血栓形成的机率从而导致心血管疾病或中风的发生。Boushey 等人针对27个研究报告,其中包含超过 4000 例的检测者进行 meta 分析,结果显示血浆中同型半胱氨酸浓度升高 5 微摩,男性患冠心病的 OR 值(ODDS RATIO)为 1.6 倍,女性为 1.8 倍;患脑血管疾病的 OR 值为 1.5 倍,而周围血管疾病也具有明显的相关性。

    血浆中同型半胱氨酸十分稳定,在室温下可稳定数天,如血浆冷冻于-20度可保存 5 年以上时间。但其浓度会依靠检体收集后全血放置时间的不同而有所差异,如采集后的全血放置室温 1 小时后再进行离心,分离出的血清,其同型半胱氨胺酸浓度会上升 10%,而室温放置 24 小时后,其浓度会上升 190%。所以检测同型半胱氨胺酸最佳的检体采样方式为将收集的全血放置于 2-8 度,并于30 分钟内离心,分离出血清保存。

    检测试剂的反应原理

    以还原剂将氧化态的同半胱氨酸还原,再以基因重组的同型半胱氨酸酶将同型半胱氨胺酸分解,分解产物之一硫化氢与呈色剂、氧化剂反应生成蓝色化合物,其在 660nm 处显色。

     检测试剂性能
 
    本实验采用上海复星长征医学科学有限公司的同型半胱氨胺酸试剂盒(内含相应的校准品和质控品)批号:D070823,D070617,D071204

    自动生化检测分析仪:奥林巴斯  AU400

    试剂的检测结果

    一、精密度

     1、批内精密度

   

     2、批间精密度

    

    二、灵敏度 

    检测低限(Detection limit)为 0.1μM,功能灵敏度(Function sensitivity)为0.5μM。
 


    三、线性范围
   
    可检测范围 1-40μM 的样本。取 40μM 的样本进行10点线性稀释后测定,每点测 3 次,取其平均值,计算相关方程及相关系数。
   
    相关方程:Y=0.9875X+0.232

    相关系数:R=0.9994

 

    四、临床样本相关性

    检测 50 例左右的临床样本(同型半胱氨酸的样本浓度覆盖检测范围)

    1、与 HPLC 法相关性

    相关方程:Y=0.9004X+1.8702

    相关系数:R=0.997

    2、与雅培 Axsym 法相关性

    相关方程:Y=0.9745X+0.2231

    相关系数:R=0.9683

 

    五、正常人参考范围

    对 229 例正常样本(雅培 Axsym 试剂检测为正常值)进行检测,经数据统计后,得
 
    

    

     
    根据 95%的百分位法计算得正常人的参考范围为0-18μM。

    同型半胱氨酸作为心血管检验的重要指标在临床上越来越受到临床检验医师和临床医生的重视。上海复星长征医学科学有限公司开发的同型半胱氨酸试剂盒具有省时、省工、便利、准确度好,灵敏度高等特点,能满足广大临床的需求。因试剂方法自有的特点,试剂在临床使用时需注意二点。一、检体的及时收集和分离,最好使用含分离胶的采血管;二、因工作试剂的稳定时间仅能稳定 2 天,为了提高临床的准确性,试剂使用时需每天对其进行定标。

参考文献

1  Blacher  J,Benetos  A(2002)Relation  of  plasma  total  homocysteine  to cardiovascular Mortality in a French Population.Am J Cardio 90,591-595

2  Clark  R,Daly  L,Robinson  K,et  al(1991)  Hyperhomocysteinemia:an independent risk factor of vascular disease.N Engl J Med 324,1149-1155.

3 Miller JW(2002) Homocysteine,folate deficiency,and Parkinsons disease. NutrRev 60,410-413.

来源:上海复星长征医学科学有限公司

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