首页 在线EQA 新闻资讯 会议会讯 政策法规 学术交流
在线IQC 下载中心 临床检验参考区间 血铅检测
POCT血糖  检验结果互认  新生儿疾病筛查  实验室管理办法
EQA不及格分析   质量指标   六西格玛   检验科工作的医师
室间质评 实验室采集 新筛采集
首页 >> 学术交流 >> 学术研究
双歧杆菌血凝特性的研究
更多相关文章    时间:2010/3/24 10:55:20,点击:0

  作者:郑跃杰

  作者单位:第四军医大学西京医院小儿科

       摘 要:观察3株双歧杆菌对人O型、人B型、绵羊、兔、鸡和小鼠红细胞的凝集滴度,并对其血凝素进行了提取。结果表明,3株双歧杆菌均能凝集各种来源的红细胞,血凝滴度无明显差异;D-甘露糖不能抑制血凝。提取的脂磷壁酸(LTA)具有血凝活性。其血凝素受体为糖类。

  关键词:血凝素 双歧杆菌

  血凝试验已被广泛应用于研究细菌与宿主细胞之间的粘附[1,2]。广义而言,血凝素也是一种粘附素,已证实一些细菌的血凝素和粘附素为同一物质,如肠毒性大肠杆菌的菌毛既能粘附于人或动物的肠上皮细胞,又能凝集不同种的红细胞,呈现甘露糖抵抗血凝(MRHA)。血凝试验已作为一些细菌的粘附能力的标志,并用作菌毛检测分型及鉴别毒力的依据[3,4]。双歧杆菌是人体肠道最重要的生理性细菌,它的粘附与定植对维持肠道正常菌群的稳定,抵御外来细菌的入侵起主导作用。但迄今为止,尚未见到双歧杆菌血凝特性的研究报道,本研究系统地观察了双歧杆菌的血凝特性。

  1、材料与方法

  1.1 血凝试验 

  1.1.1 菌株及生长条件 双歧杆菌1027及1124株为本所从健康婴儿粪便分离,经多次生化鉴定为青春型双歧杆菌。日本青春型双歧杆菌标准株由深圳南山区医院曾忠铭博士提供。将细菌分别接种于双歧杆菌选择性琼脂平板及硫乙醇酸盐液体培养基,37℃,厌氧培养48h后,固体生长的细菌用pH7.4PBS,液体生长的细菌分别用耗尽培养液上清、新鲜培养液及PBS悬浮细菌,调整菌悬液浓度为1×108/ml。

  1.1.2 血凝试验 采取人O型、人B型、绵羊、兔、鸡和小鼠新鲜血(柠檬酸盐抗凝),红细胞经0.9%盐水洗涤3次后,悬浮于盐水内,制成2%(V/V)红细胞悬液。将等量(150μl)对倍稀释的细菌悬液和红细胞悬液加入“U”形底的40孔酶联反应板内,振荡后,置37℃温育1h观察结果,并经显微镜下观察证实。能引起血凝反应的菌悬液最高稀释度为血凝滴度。

  1.2 各种处理因素的影响

  1.2.1 对耗尽培养液上清的处理 耗尽培养液上清分别经胰蛋白酶(37℃ 30min),牛血清白蛋白(BSA)(37℃ 30min),氢氧化钠(37℃ 30min)和高温(100℃10min )处理后,进行血凝试验。

  1.2.2 对红细胞悬液的处理 红细胞悬液分别经不同浓度过磺酸钠(37℃ 30min)或胰蛋白酶(37℃ 30min)处理后,进行血凝试验。

  1.2.3 各种糖抑制试验 于双歧杆菌耗尽培养液上清中分别加入葡萄糖,乳糖,蔗糖,D-果糖,L-山梨糖,棉子糖,麦芽糖,纤维二糖,D-木糖,鼠李糖及D-甘露糖(终浓度1%),进行试验,用pH7.4PBS作对照。

  1.3 双歧杆菌脂磷壁酸(LTA)的提取 将液体培养的双歧杆菌细菌悬液离心3000 rpm,10分钟,上清即为细菌耗尽培养液上清。参照文献[5~7],于耗尽培养液上清中加入等体积重蒸酚,在 65℃ 下振摇30min,冷却后,离心4000rpm20min,收集 水相。重复酚提一次,终产物经蛋白酶K消化以去除残留蛋白。

第1页 第2页 第3页 第4页
更多相关文章】【打印】【关闭
 
更多相关的信息
    ·HCG定量检测中关注的学术问题
    ·2010年美国癌症学会前列腺癌早期筛查指南更新解读
    ·显微镜检查与干化学试纸条检测尿红、白细胞临床应用探..
    ·乙醇脱氢酶活性测定对各类肝细胞损伤的诊断价值研究进..
    ·AsAb与EMAb及AcL检测在女性不孕不育中的意义
    ·1116例上消化道出血患者ABO血型统计分析
    ·晋中市Rh阴性献血者血清学表型和不规则抗体调查
    ·太原地区健康人群血清总胆红素和直接胆红素参考范围调..
    ·3种方法检测痰结核分枝杆菌的比较
    ·定量PCR中SYBR Green I的替代
 
类别
临床检验 检验技术
检验仪器和试剂 实验室管理
学术研究 检验常识
相关文章
热点信息
    ·检验科个人工作总结
    ·尿沉渣管型检查(综述)
    ·支原体肺炎患儿自身免疫功能的检测及分析
    ·HCG定量检测中关注的学术问题
    ·尿液分析仪检测尿中白细胞几点看法
    ·检验知识
    ·医院检验科人员的职业危害与防护
    ·2009年度检验科主任个人工作总结
    ·常见发光免疫分析技术的比较
    ·TORCH检测与优生优育
最新推荐
    ·在两台全自动生化分析仪上检测肌酸激酶(CK..
    ·同型半胱氨酸(Homocysteine)检测试剂简介
    ·体外诊断企业如何适应检验医学发展
最新产品发布
 ·临床检验质量指标—危..
 ·临床检验质量指标
 ·临床检验风险管理
 ·临床检验质量控制技术..
 ·临床微生物学检验
 ·CLInet-EQA系统
 ·临床检验6σ质量设计与..
 ·临床检验生物学变异与..
 ·《临床检验方法确认与..
 ·实验室内质量控制管理..
产品关注排行
 ·实验室内质量控制管理..
 ·临床检验质量控制技术..
 ·《临床检验方法确认与..
 ·临床检验质量控制技术
 ·临床检验质量控制技术..
 ·全自动生化分析仪
 ·临床检验6σ质量设计与..
 ·临床实验室管理学
 ·全自动细菌鉴定及药敏..
 ·临床检验质量指标—危..
clinet简介 | 服务指南 | 广告服务 | 联系我们 | 产品答疑 | 给学术交流投稿 | 客户投诉
国家药监局(京)-非经营性-2006-0012
京ICP备10200817号-1
Copyright 2008 @Clinet.com.cn 版权所有