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临床微生物检验总论
分子生物学方法要点
名称 方法 临床应用
G+C mol% 被测菌G+C含量与已知菌G+C含量对比 细菌分类
DNA-DNA杂交 测未知菌碱基对（ATCG）排列与已知菌 同种杂交率80%以上
特异核酸片断碱基对排列顺序结合率 同属杂交率60%以上
指纹分析 一种质粒，其DNA排列顺序相对稳定的，
被特异性内切酶切成几个DNA片断经电 医院内感染流行病学调查的
泳可得酶切图谱，再与标记物对比可 有效手段
判明未知DNA分子大小。
核酸（DNA成 用已知菌特异的核酸片断（探针）测被检菌的核酸 细菌种属的鉴定
RNA）探针聚合 使用探针技术检测被检菌的扩增产物。 常用于不易培养的病原菌
酶链反应（PCR） 现FDA只认可HIV，沙眼 衣原体和结核分支杆菌
PCR扩增步骤：
5’―――――3’ 注：3’、5’是磷酸在戊糖上的碳位
方法 被检物 特异性灵敏性 假阳性假阴性 应用
质粒指纹分析 培养物 - - 流行病学调查
核酸探针 培养物 + - 鉴定细菌
聚合酶链反应（PCR）标本扩增 ？ + 鉴定细菌
标本的处理原则
（一）正确选择和采集标本，无菌采集，保持新鲜。
（二）正确运送标本，避免污染，避氧（厌氧菌）。
（三）正确的运用培养基。普通培养基和选择培养基，采自有菌部位标本不增菌只划平板，采自无菌部位标本增菌并
划平板。
（四）提供适合细菌生长的培养环境有氧，无氧成5-10%CO2
微生物的发展趋势
一、免疫功能低下群体感染病人不断增加。
二、病原菌的改变。
传统的致病菌向条件致病扩展。
外源性向内源性菌扩展
病原菌耐药性不断增强
真菌、病毒的感染不断上升。
三、病原的鉴定方法向分子生物学和免疫学方向发展。
四、细菌药敏试验的方法。
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