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FQ-PCR检测结果1拷贝/μl=1000拷贝/1ml吗?
[ 2008-7-18 20:02:00 | By: pzhh ]
 

Poisson分布两样本均数比较时,抽样单位应相同,否则要将大单位化为小单位,不能将小单位扩大为大单位。

1拷贝/μl,表示抽样单位是1μl血清,低于1拷贝/1μl的检测结果只有1个,即0拷贝/1μl,不存在01之间的拷贝数(反应管无典型扩增曲线,检测结果为阴性,按卫生部临床检验中心要求报告为“低于检测下限”);还表示一次抽样结果为0的概率最少可达0.36788,结果在(04)拷贝/1μl的概率和为0.996。表示检测结果是0拷贝/1μl与检测结果是1拷贝/1μl一样,是一个定量结果,出现的概率都高达0.36788

1000拷贝/1ml,表示抽样单位是1ml血清,低于1000拷贝/1ml的检测结果有999998101000个;还表示一次抽样结果为0拷贝/1ml的概率为0(一次抽样结果小于905拷贝/1ml的概率低于0.003),结果在9051095拷贝/1ml的概率和为0.997Poisson分布总体λ>50时近似正态分布,范围是T±uα* ,可信限为99.7%uα=3)。表示检测结果是0拷贝/1ml与检测结果是1拷贝/1ml一样,仍是一个定量结果,但其出现的概率都已低于0.003

在目前的FQ-PCR实际检测过程中,抽样单位是1μl。当T1拷贝/1μl时,参评单位检测到的低于1拷贝/1μl的检测结果只有10拷贝/1μl(不存在01之间的拷贝数),这个结果出现的概率达0.36788,应判为可接受(室间质量评价时以样本检测结果出现的概率太小才被判不可接受,即小概率事件原理,通常控制第一类错误的概率α在0.010.05以下)。如果放大抽样单位为1ml,把1拷贝/1μl当成1000拷贝/1ml来看,就容易错误地认为参评单位检测到的低于1拷贝/1μl的检测结果应该有9999981拷贝/1ml 1000个而不是仅有10拷贝/1μl,检测结果>0时都可接受(不管这一检测结果出现的概率有多小)、为0则不可接受(不管它出现的概率有多大)。错误地认为此样本“有较多的实验室不是测定低,而是根本就测定为阴性。”

定量PCR检测结果的统计学特征

 
 
  • 标签:PCR 
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