细菌L型是细菌细胞壁缺陷型。每种细菌都有其固定的形态，其形态决定于细菌最外层的细胞壁，细菌细胞壁不同程度缺失导致细菌变成细菌L型。细菌L型最早由Klieneberger发现，他于1935年从念珠状链杆菌的培养物中发现有一种微小的菌落，当时认为是一种支原体，并命名为L1(以他工作的lister研究所的第一个字母而定)。随后发现其它细菌也能分离出细菌L型，用青霉素、溶菌酶等在体外可诱导细菌L型的产生，并证明细菌L型在无细胞壁的情况下仍能生长繁殖。

自抗生素问世以来，在医学领域中发挥了十分重要的作用，但抗生素的广泛和大剂量使用其副作用带来的忧虑越来越明显，特别是抗生素的滥用，使耐药性菌株和细菌L型日益增多，以及抗生素长时间应用造成菌群失调和医院交叉感染等已成为现时医院中急待解决的一大难题。

　　1　细菌L型的产生

　　细菌L型是细菌细胞壁部分缺损或完全丧失而造成的。细菌胞壁的缺失可以是自发的，也可以是人工诱导的，但人工诱导的频率远比自发为高。最早发现自发产生细菌L型的细菌是念珠状链杆菌。自发产生细菌L型的机制目前还不十分清楚。Maevskii报道：在节肢动物体内的不同时期，耶尔森氏菌可以改变其形态和超微结构。他用光学显微镜、电子显微镜和培养方法观察了节肢动物体内不同时期的耶尔森氏菌的细胞壁，发现耶尔森氏菌能自发地发生细菌L型转化。

　　人工方法诱导细菌变为L型细菌的因素较多，有抗生素如青霉素、先锋霉素、万古霉素、杆菌肽、溶葡萄球菌素；酶类如溶菌酶和脂酶；氨基酸如甘氨酸、蛋氨酸、甲硫氨酸；机体的一些免疫因素如抗体、补体、吞噬细胞；物理因素如紫外线；化学因素如亚硝基胍和去氧胆酸盐等。这些因素根据其作用机理分为4类：一些影响细菌DNA发生改变的因素；直接破坏细胞壁的因素；阻断肽聚糖合成的因素；机体的一些免疫因素。

　　在不利的环境条件下，细菌转变成细菌L型，这可能是细菌抵抗不利环境条件的一种方式，Zykin对鼠疫耶尔森氏菌L型进行了15年的研究，结果表明：蚤和蜱体内持续存在的鼠疫耶尔森氏菌能转变成细菌L型，并能持续生存几年之久，当这些细菌L型回复成细菌型后，可引起感染。Crowle试验表明：结核杆菌被巨噬细胞吞噬后易变成细菌L型，其原因可能是结核杆菌在抗生素、抗体、补体和溶菌酶等体内因素的作用下，导致细胞壁部分或完全缺失形成细菌L型。

　　在不少病例中可以看到细菌L型是在治疗过程中分离到的，心内膜炎是最早分离到细菌L型的疾病之一。Schmitt对用青霉素治疗过的心内膜炎患者作细菌分离培养，在101例确诊为细菌性心内膜炎病例中，82例分离到典型的或不典型的L型，其中甲型溶血性链球菌62例、金黄色葡萄球菌16例、大肠埃希氏菌4例。

　　Domingue对一些曾用过抗生素的慢性泌尿道感染患者进行检查，96%的患者可分离出多形性L型细菌，这些细菌经培养后又可回复成革兰氏阳性的金黄色葡萄球菌与链球菌。Yamamolo与Homma对10例铜绿假单胞菌感染病例用青霉素治疗，其中4例从患者的尿、脓、痰中分离出L型铜绿假单胞菌。Grape报道：淋病患者用青霉素治疗后，有12%患者可以分离出L型细菌，这些细菌L型对青霉素的耐药比原菌株高，认为这些淋球菌L型的出现可能是由于治疗不当而引起的。

　　以上病例中，L型细菌的出现都发生在临床用药治疗之后，并且有一定的耐药性，说明用药剂量不足或用药不当是产生细菌L型的重要原因之一。

        间接免疫荧光法（IIF）是最先应用，目前仍为最常用经典的ANCA检测方法。在IIF检查中，pANCA和ANA很难区分，应用淋巴细胞和交联性固定剂有时可有帮助。但如果两者并存，特别是ANA滴度较高时则鉴别及其困难，二者可互相掩盖。因此，ANA阳性，特别是强阳性者，应用IIF法检测ANCA是不可取的，其结果也是不可靠的。

       抗原特异性ELISA检测方法近年来得以迅速推广，由于不同的ANCA及其不同的抗原系统往往和临床上不同的疾病或临床综合征相关，故抗原特异性ELISA显示出了它们独特的优点。它们更敏感、更特异，可以直接用于协助临床相关疾病的诊断和分类，在指导治疗、判断复发上意义重大。一些重要的抗原特异性ELISA如PR3-ELISA；MPO-ELISA和BPI-ELISA已经商品化，在发达国家已列为常规检查项目。晚近欧洲14个小血管炎研究中心联合开展了对ANCA检测方法的评估，研究了IIF法、PR3-ELISA和MPO-ELISA对原发性小血管炎和特发性新月体性肾炎的敏感性和特异性。结果发现IIF法联合抗原特异性ELISA是值得推荐的。如cANCA合并抗PR3抗体阳性，pANCA合并抗MPO抗体阳性，则二者用于诊断原发性小血管炎的特异性可以达到99%。

        中、老年肾炎综合征、肾功能进行性减退，伴全身一般症状（如发烧、关节肌肉痛、体重下降等）和/或肺出血时应高度怀疑本病的可能。血清ANCA阳性，肾活检光镜显示肾小球纤维素样坏死或伴新月体形成，免疫荧光阴性或仅微量免疫球蛋白沉积，具备上述特点则原发性小血管炎及其肾损害可成立。

        临床上肺部炎症或咯血，胸片表现为片状阴影，经抗生素积极治疗无效者、与出血及肾功能下降不平行的贫血、不明原因视力减退，听力下降，甚至耳聋等，应常规检测ANCA。

    原发性小血管炎呈肺－肾综合征者应与Goodpasture病鉴别。前者ANCA阳性(ANCA阳性的肺肾综合征，可有部分为IgM-ANCA，而且与肺部出血密切相关)、后者抗肾抗体阳性。值得注意的是，Goodpasture病患者可约有10-30%患者除抗GBM抗体阳性外，还可同时合并有ANCA，但其发生的原因及其临床意义尚不清。

        尽管原发性小血管炎的发病机制还不是很清楚，但对于该病的治疗已取得一定进展。

免疫病理显示无或少量免疫球蛋白和补体成分沉积。电镜下电子致密物缺乏，可见广泛GBM破坏。

        原发性小血管炎的临床表现多种多样，很容易造成误诊。

        原发性小血管炎好发于中、老年，男性略多。但该病可见于各个年龄组，可从2岁到90岁不等，青少年女性患者也不少见。该病白种人多见，在美国其白种人的发病率是黑人的7倍。多数病人有上感样前驱症状，好发于冬春季。常有发热、疲乏、关节肌肉疼痛和体重下降等非特异性症状。该病中较为常见的受累脏器为肾脏、皮肤、关节、肺等。

        肾脏受累患者约半数病人就诊时表现为急进性肾炎综合征，早期出现少尿、无尿、肾功能进行性恶化；但也有部分病人为非少尿性急性肾功能衰竭。少数病人肾功能呈缓慢渐进性减退，偶见个别病人肾功能可维持正常。几乎所有患者均有变形红细胞尿，多伴有不同程度蛋白尿，多为轻中度，但我国资料显示肾病综合征范围的蛋白尿也不少见。高血压并不多见，但肾脏病变严重者也可有难治性高血压。

        肾外表现最值得注意的是肺部病变。临床上可有哮喘、咳嗽、咯血痰/咯血，重症因肺泡广泛出血而发生呼吸衰竭危及生命。30%～60%发生肺出血。胸片可显示双中下叶小叶性炎症，或因肺泡出血呈密集的细小粉末状阴影，由肺门向肺野呈蝶形分布。WG患者肺部可见到结阴影及空洞。肺部的小血管炎表现常被误诊为肺部感染、肺结核和肺部肿瘤，需引起高度重视。除上述急性小血管炎病变外，肺部受累也可表现为慢性病变，如肺间质纤维化和闭塞性小支气管炎。

        原发性小血管炎常累及上呼吸道，特别是WG。鼻窦炎或副鼻窦炎较多见，鼻甲肥大可影响患者呼吸，甚至需手术切除。咽鼓管炎可导致中耳炎，甚至继发细菌感染。耳受累还可表现为听力下降，特别是高频区。眼受累最常见的表现为“红眼病”，一般认为系虹膜炎、巩膜角膜炎和色素膜炎等小血管炎病变所致。

        肾外脏器中关节肌肉，皮肤，消化道和外周神经受累也较常见。关节肌肉受累主要表现为关节、肌肉疼痛，不适。严重者可导致行动受限，甚至长期卧床。皮肤病变可多种多样，表现为皮疹、紫癜，严重者可有深浅不一的溃疡形成。消化道血管炎往往不被重视，实际上约1/3～2/3 ANCA阳性的肾小球肾炎患者有胃肠道受累。多数病人表现为不易愈合的胃或十二指肠溃疡，这些病人往往对糖皮质激素治疗有反应。其他常见的胃肠道小血管炎表现为胃肠道出血和黑便、腹痛、难治性腹泻。外周神经病变最为常见的是多发性单神经炎，临床表现随受累神经的走行而异。中枢神经系统受累较少见。

        随着检测水平地提高，原发性小血管炎的检查逐渐成熟，也更加准确！

       原发性小血管炎的病因和发病机制不清，但认为与ANCA有关。

       中性粒细胞可以被一系列促炎症因子（IL-1、TNF、TGF-、LPS等）刺激而处于初步活化状态，导致胞浆内ANCA的特异性靶抗原如蛋白酶3（PR3）和髓过氧化物酶（MPO）等可以在细胞表面表达。血清中的ANCA与相应的抗原结合可最终激活中性粒细胞导致脱颗粒反应，产生氧自由基和释放蛋白酶从而造成血管内皮的损伤。

      体外实验证实：处理过的内皮细胞也将更容易受到损伤导致血管炎的发生。此外，中性粒细胞释放的ANCA靶抗原，在生理条件下，多为带正电荷的蛋白质分子，如MPO和PR3则以非共价键的方式结合到带负电荷的内皮细胞表面。MPO粘附到内皮细胞的表面可对血管壁造成损伤，其一，如果病人局部有H2O2和氯离子，MPO可以催化生成次氯酸从而直接造成内皮损伤，其二，粘附的MPO成为ANCA的直接靶抗原，这样抗MPO的自身抗体可以引起一个补体依赖性的内皮细胞溶解的刺激，内皮细胞表面的细胞间粘附因子1(ICAM-1)表达也将上调，这样则更易于和活化的中性粒细胞相结合，同时TNF ANCA还可以激活中性粒细胞使其更容易通过整合素(CD11/CD18)粘附到内皮细胞的表面，如果内皮细胞先经过TNF1－抗胰蛋白酶。ANCA与靶抗原相结合，势必对抗原分子自身的生化功能有一定的影响。PR3是一个中性丝氨酸蛋白酶，可以降解弹力蛋白，其生理抑制剂主要为1-抗胰蛋白酶之间的结合，使PR3不能完全被灭活。有作者认为ANCA和PR3的复合体本身就可以直接在WG中引起坏死性炎症反应。进一步的研究则证实：抗PR3抗体可以干预PR3和1-抗胰蛋白酶缺乏的人群中，其抗PR3阳性的系统性小血管炎发生率明显高于正常人群。1-抗胰蛋白酶灭活的能力越强，则WG复发的机会越高；在ANCA抑制PR3被 MPO的主要功能是催化产生氧化剂，如次氯酸。有一组研究观察到抗MPO阳性病人血清中的IgG可以抑制液相MPO的化学发光能力。

       很多病人的ANCA是以IgG1和IgG4亚型为主，这一现象支持反复抗原暴露引起的T细胞介导的身身免疫反应。引起免疫反应的中心环节是T细胞受体、抗原分解而来的短肽和MHC II类抗原分子三者之间的相互作用。目前有研究证实HLA-DQw7位点和ANCA相关小血管炎密切相关。而且有可能在发病机理上起一定的作用，HLA-DQw7或其相连锁的等位基因（DR4，DR5或DR6）很可能更容易向T细胞的受体呈递ANCA的相关抗原。事实上，WG在肺和肾脏的炎症病灶和肉芽肿中有大量的炎症细胞侵润，这些细胞主要是单核细胞和淋巴细胞，淋巴细胞中以CD4+的T细胞为主。此外，还有其它一些T细胞活化的标记物，其中包括携带高亲和力IL-2受体的CD25+T细胞数目增加；可溶性IL-2受体的浓度升高，以及在WG复发之前常可观察到IL-2受体水平的升高。

        凡与肾脏有关的疾病，病理检查都是针对其诊断和治疗的基础。

Analysis on distribution and drug-resistance of pathogens in positive blood culture

[Abstract] To investigate the distribution and drug-resistance of pathogens in positive blood culture in hospital,so as to provide reference for the diagnosis and therapy of  hematologic infectious diseases.  Methods: Retrospective analysis was performed to analyze the distribution and drug-resistance of 1345 strains of pathogens causing hematologic infection. Results: Of 1345 isolated pathogens from the positive specimens of blood culture in our hospital, 550( 40. 8% ) were Gram-negtive bacteria , including Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumann; 468( 34. 9% ) were Gram-positive bacteria, including Staphylococcus aureus, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Streptococcus mitis, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus hominis, Staphylococcus haemolyticus. 39( 2. 9% ) were yeast fungi;  including Candida tropicalis, Candida albicans, Candida parapsilosis. Gram-negative bacilli were more sensitive to Imipenem and Amikacin. Gram-positive cocci were more sensitive to Linezolid, Fosfomycin, Vancomycin and Teicoplanin. Fungi were sensitive to 5- Flucytosine, Amphotericin B, Fluconazol and Itraconazole.Conclusion: There are varieties of pathogens isolated from blood culture. Gram- negative bacilliis the major pathogen for bacteremia in this area, which shows a serious and broad spectrum drug-resistance. It’s important to monitor the pathogens drug-resistance in order to guide reasonable clinical medication.

Application of BACTEC MGIT 960 system in preliminary identification of mycobacterium and antimicrobial susceptibility test

Abstract: objective to evaluate the application of BACTEC MGIT 960 system in mycobacter ium identification and antimicrobial susceptibility test. The growth forms of 162 strains in liquid media were observed with microscope. Mycobacterium strains were identified by real-time PCR and traditional biochemistry method. The relation betw een bacter ia form and strain categarly was analyzed. The susceptibility testing of Mycobacterium tuber culosis of 4 major antituberculosis drugs were detected with BACTEC MGIT 960 system. Four growth forms of cording , clump and branch, load and scatter, and coccoid form were observed from 162 strains in liquid media. Among these, 132 strains of cording form were all M. tuberculosis, 10 strains of coccoid and 6 strains of load and scatter form were all nontuberculosis mycobacteria. Of the 141 strains mycobacterium tuber culosis complex , the rate of multi-drug resistance ( MDR)- TB was 8. 5%, the drug resist ance rate of streptom ycin, iso niazid, rifampicin and ethambutol were 9. 9%, 14. 2% , 9.2% and 6.4% respectively. The mean time of antimicrobial susceptibility test was 9. 3 days. System is quick and accurate to identify mycobacterium strains and acquire antimicrobial susceptibility results.

核仁型 

核颗粒型 

胞浆型

着丝点型

    为了使实验操作标准化，欧蒙开发了滴定平板技术，滴加标本或标记抗体至加样板的反应区，然后将生物薄片载片盖在加样板表面的凹槽里，这时，载片上的所有生物薄片均与液滴接触，反应同时开始。系统的几何结构决定了液滴的位置和高度。因为液体被局限在一封闭的空间里，所以不再需要传统的“湿盒”。并且可在一致的反应条件下同时温育任何数量的标本。

准备：检查加样板是否反应区亲水而周边疏水？如果不是，可用湿纸巾擦拭，必要时可使用家用洗涤剂或Extran MA 01（默克公司），再用水彻底冲洗。需要消毒时，可于3％的Sekusept Extra （汉高公司）中浸泡1小时。只有当载片平衡到室温后方可打开袋子。不要触及生物薄片。按照要求用记号笔对玻片进行标记。

稀释： 按照试剂盒使用说明稀释血清标本。每次实验均需加入阳性和阴性对照。对照血清使用前必须混匀。

加样：在加样板的每个反应区加入稀释血清，避免产生气泡。滴加完所有待测标本后才开始温育（一次最多200份）。使用聚苯乙烯加样板。

加样体积:

10 µl/反应区(3 x 3 mm)

25 µl/反应区(5 x 5 mm)

70 µl/反应区(7 x 9 mm)

温育：将载片盖在加样板对应的凹槽里，反应即开始。确保每个标本均能够与生物薄片相接触，而标本之间不相互接触。室温温育30分钟。

清洗：用烧杯盛PBS-Tween缓冲液，流水冲洗载片，然后立即放入装有PBS-Tween缓冲液的小杯中浸洗至少5分钟。

冲洗1秒钟

小杯内浸洗5分钟

加样：将荧光标记的抗人免疫球蛋白（酶结合物）加入洁净加样板的每个反应区。完全加完所有的二抗后，方可继续温育（最多可加50个载片）。使用连续加样器。加样前应使用加样器混匀。为节约时间，可在第一步温育的同时滴加酶结合物至另一个加样板的反应区中。

加样体积:

10 µl/反应区(3 x 3 mm)

20 µl/反应区(5 x 5 mm)

60 µl/反应区(7 x 9 mm)

温育：从PBS-Tween 清洗缓冲液中取出一张载片，5秒钟内用吸水纸擦一下背面和边缘后，立即将载片覆有生物薄片的一面朝下，盖在加样板的凹槽里。注意：为防止破坏基质，不要擦拭反应区的间隙。检查生物薄片是否与液滴接触良好，然后继续下一张。从现在开始，注意避免阳光直射载片。室温温育30分钟。

清洗： 用烧杯盛PBS-Tween缓冲液，流水冲洗载片，然后立即放入装有PBS-Tween缓冲液的小杯中浸洗至少5分钟。可在每150ml磷酸盐缓冲液中加10滴(150 µl)伊文氏蓝进行复染。

冲洗1秒钟

小杯内浸洗5分钟

封片： 在盖玻片上滴加甘油/PBS。使用聚苯乙烯封片板。从PBS-Tween 清洗缓冲液中取出一张载片，用纸擦干背面和四边，注意不要擦拭反应区间隙。将载片的生物薄片朝下置于准备好的盖玻片上，立即检查盖玻片是否放入载片的凹槽里，如有必要，需调整位置，正确放置。然后再进行下一个载片的操作。

封片体积:

10 µl/反应区(3 x 3 mm)

10 µl/反应区(5 x 5 mm)

20 µl/反应区(7 x 9 mm)

结果判断：荧光显微镜下观察荧光。

本次实验以荧光免疫显微技术检测抗核抗体(ANA)为例进行实习。

抗核抗体实验原理

     以小鼠肝细胞或某些培养细胞(如Hep-2)作抗原片，将病人血清加到抗原片上。如果血清中含有ANA，就会与细胞核成分特异性结合。加入荧光素标记的抗人IgG抗体又可与ANA结合，在荧光显微镜下可见细胞核部位呈现荧光。

操作方法

 1．准备：检查加样板，生物载片恢复室温，标记。

 2．稀释：PBS-Tween缓冲液稀释血清，设阴阳性对照。

 3．加样：加样板放于泡沫塑料板上，加25μl稀释后血清，至加样板的每一反应区，避免气泡。加完所有标本后开始温育。

 4．温育：将生物薄片盖于加样板的凹槽里，反应开始，室温温育30分钟。

 5．冲洗：用烧杯盛PBS-Tween缓冲液流水冲洗生物薄片，然后立即将其浸入盛有PBS-Tween缓冲液的小杯中至少1分钟。不必混摇。

 6．加样：滴加20μl荧光素标记的抗人球蛋白（结合物）至一洁净加样板的反应区，完全加完方可继续温育。荧光素标记的抗人球蛋白用前需混匀并以PBS-Tween缓冲液稀释。

 7．冲洗：用烧杯盛PBS-Tween缓冲液流水冲洗生物薄片，然后立即将其浸入盛有PBS-Tween缓冲液的小杯中至少1分钟。不必混摇。

 8．封片：将盖片直接放于泡沫塑料板凹槽中，滴加甘油/PBS至盖片：每反应区约10μl。从PBS-Tween缓冲液中取出1张生物薄片，用纸擦干背面和四边。还要擦拭反应区间隙。将生物薄片面朝下放在已准备好的盖玻片上，立即查看并调整使盖片嵌入载片的凹槽中。然后继续下1张。 

结果判定

荧光显微镜下观察

 1．细胞核发黄绿色荧光为阳性染色细胞，不发荧光为阴性。抗原片中出现阳性染色细胞为ANA阳性，否则为阴性。阳性待检血清可作进一步稀释后测定效价。

 2．根据细胞核着染色荧光的图像，可区分为：

 ①均质型：细胞核呈均匀一致的荧光；

 ②周边型(核膜型)：细胞核周围呈现荧光；③斑点型(颗粒型)：细胞核内呈现斑点状荧光；

 ④核仁型：核仁部分呈现荧光。

 ⑤混合型：两种以上核染色；

 ⑥应用细胞片做抗原片可检出着点型(ACA)

注意事项

 1．PBS-Tween缓冲液在4℃下可存放两周。

 2．根据每次实验的标本量决定需要稀释的FITC标记的抗人球蛋白的量，稀释后可在4℃下可存放1周。

 3．血清或FITC标记的抗人Ig应滴加至加样板上，不能直接滴到载片上。

 4．载片盖到加样板上后，确保反应区与液滴完全接触后，才开始记时温育。

 5．冲洗载片时水流要缓慢，以免冲洗掉基质。载片上的反应区应保持湿润，不要将载片风干。

 6．封片进不可用力挤压盖玻片，以免损坏基质。可左右挪动盖玻片以使其正确嵌入载片凹槽里。

 7．封片介质含有荧光稳定剂，应保存在2-8℃。封好的载片可于4℃长期保存。

一 生物学特性

（一）形态结构与染色

     结核杆菌为细长略带弯曲的杆菌，约1~4×0.4μm，抗酸染色阳性，該菌无鞭毛和芽胞，胞壁外有一层荚膜。

（二）培养特性与生化

     营养要求较高，专性需氧。最适温度为37℃，低于30℃不生长，pH以6.5~6.8为宜。常用罗氏（Lowenstein-Jensen）培养基，内含蛋黄、甘油、马铃薯、无机盐和孔雀绿等。孔雀绿可抑制杂菌生长，便于分离和长期培养。蛋黄含脂质生长因子，能刺激生长。结核杆菌细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质的吸收，故生长缓慢，在固体培养基上2~4周才可见菌落生长。典型的菌落为粗糙型，呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明。在液体培养基中由于细菌含脂质量多，具疏水性，并有需氧要求，故易形成皱褶的菌膜浮于液面。

（三）抵抗力

     结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强。粘附在尘埃上保持传染性8~10天，在干燥痰内可存活6~8个月；对酸（3%HCl或6%H₂SO₄）或碱（4%NaOH）有抵抗力。15分钟不受影响。可在分离培养时用于处理有杂菌污染的标本和消化标本中的粘稠物质；对1：75000结晶紫或1：13000孔雀绿有抵抗力，加在培养基中可抑制杂菌生长。该菌对湿热、紫外线及酒精敏感，在液体中加热62~63℃15分钟或煮沸、直接日光照射2~7小时或75%酒精2min即可被杀死。对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、对氨基水杨酸等敏感，但长期用药容易出现耐药性。

（四）变异性

     结核杆菌可发生形态、菌落、毒力、免疫原性和耐药性等变异。1908年Calmette与Guerin二人将有毒的牛型结核杆菌培养在含甘油、胆汁、马铃薯的培养基中经13年230次传代，获得减毒活菌菌株（卡介苗 BCG），用于预防结核病。

二 致病性

（一） 致病物质 结核杆菌不产生内、外毒素和侵袭性酶。其致病主要与菌体成分和荚膜有关。

1、脂质 脂质的含量与毒力有密切关系。脂质的毒性成分有：①磷脂，能促使单核细胞增生，引起结核结节形成与干酪样坏死；②索状因子，为 6，6-双分枝菌酸海藻糖，因其与有毒结核杆菌的索状生长有关而得名。存在于有毒力的结核杆菌细胞壁中，它能破坏细胞线粒体膜，影响细胞呼吸，抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿；③蜡质D，是一种肽糖脂与分枝菌酸的复合物，具有佐剂作用，可激发机体产生迟发型变态反应；④硫酸脑苷脂，可抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合，使结核杆菌能在吞噬细胞中长期存活。

2、蛋白质 结核杆菌具有多种蛋白质成分，结核菌素是其中的主要成分。其本身无毒，但与蜡质D结合可诱发超敏反应，引起组织坏死和全身中毒症状，并在形成结核结节中发挥一定的作用。

3、荚膜 结核分枝杆菌荚膜的致病作用有：①抗吞噬作用，可抑制吞噬体与融酶体的结合；②黏附作用，可与某些补体受体结合；③荚膜可阻止药物及化学物质透入菌体内。

（二） 所致疾病

     结核杆菌可通过呼吸道、消化道及损伤的皮肤粘膜等多种途径侵入易感机体，引起多种脏器组织的感染，其中以通过呼吸道引起肺结核为最多。

1．原发感染：多发生于儿童。含有结核杆菌的飞沫或尘埃经呼吸道进入肺泡，即被肺泡中吞噬细胞吞噬。因菌体的脂类等成分能阻止吞噬细胞中溶酶体中的酶进入吞噬体，使细菌能在吞噬细胞中生长繁殖，导致吞噬细胞裂解死亡，释放出大量细菌，在肺泡内引起炎症，称为原发灶。因机体缺乏特异性免疫，结核杆菌可经淋巴管扩散至肺门淋巴结，引起肺门淋巴结肿大。原发灶、淋巴管炎和肿大肺门淋巴结称为原发综合征。X线检查见亚铃形阴影为其主要特征。原发综合症常能自愈，仅留钙化点，但病灶内常有一定量的结核杆菌长期潜伏，不断刺激机体维持特异性免疫，也可作为日后内源性感染的渊源。仅少数患者因免疫力低下，结核杆菌可随吞噬细胞经血流扩散，引起全身粟粒性肺结核，并常侵犯各处淋巴结、骨、关节、肾及脑膜等部位，引起相应的结核病。

2 原发后感染：多见于成年人。病灶亦以肺部多见。结核杆菌可以是外来的（外源性感染）或是潜伏于原发病灶内的（内源性感染）。由于机体已形成特异性细胞免疫，故对结核杆菌有较强的局限能力。因此，病灶常限于局部，被纤维囊包绕的干酪样坏死病灶可钙化而痊愈。若干酪样坏死被液化，排入邻近支气管，结核杆菌随咳痰排出体外，传染性很强，此为开放性肺结核。部分患者结核杆菌可进入血液循环引起肺内、外播散，如脑、肾结核，痰被咽入消化道也可引起肠结核、结核性腹膜炎等。

三 免疫性与超敏反应

（一）免疫性

     人类对结核杆菌的感染率很高，但发病率不高，这表明人类对结核杆菌有一定的免疫力。机体感染结核杆菌后，虽能产生多种抗体，但此类抗体无保护作用。抗结核免疫主要是细胞免疫。结核杆菌初次侵入呼吸道后，肺泡中未活化的巨噬细胞抗菌活性弱，不能防止所吞噬的结核杆菌生长，反可将结核杆菌带到他处。但可呈递抗原，使周围T淋巴细胞致敏。致敏的淋巴细胞可产生多种细胞因子，如INF-γ、IL-2、IL-6等能激活巨噬细胞，使吞噬作用加强引起呼吸爆发，导致活性氧中介物和氮中介物的产生而将病菌杀死。有些可直接杀伤靶细胞。

     结核的免疫属于感染免疫（infection immunity）或有菌免疫，即只有当结核杆菌或其组分存在时才有免疫力。当机体内结核杆菌或其组分全部消失后，抗结核免疫也随之消失。

（二）免疫与超敏反应

    随着机体对结核杆菌产生保护作用的同时，也可以看到有迟发型超敏反应的发生，二者均为T细胞介导的结果。从郭霍现象（Koch phenomenon）可以看到，将结核杆菌初次注入健康豚鼠皮下，10~14天后局部溃烂不愈，附近淋巴结肿大，结核杆菌扩散至全身，表现为原发感染的特点。若用结核杆菌对其豚鼠进行再感染，则于1~2天内在注射的局部迅速产生溃烂，易愈合；附近淋巴结不肿大，细菌亦很少扩散，表现为原发后感染的特点。可见再感染时溃疡浅、易愈合、不扩散，表明机体已有一定免疫。但再感染时溃烂发生快，说明在产生免疫的同时有超敏反应的参与。

     近年来研究表明，结核杆菌诱导机体产生免疫和超敏反应的物质不同。超敏反应主要由结核菌素蛋白与蜡质D共同引起，而免疫则由分枝杆菌核糖体RNA（rRNA）引起。因二种抗原成分激活不同的T细胞亚群，释放不同的细胞因子所致。

（三）结核菌素试验

     结核菌素试验是应用结核菌素来测定机体对结核杆菌是否有细胞免疫力及引起超敏反应的一种皮肤试验。结核菌素有两种 ① 旧结核菌素（old tuberculin,OT）。系将结核杆菌接种于甘油肉汤培养基，培养4~8周后加热浓缩过滤制成，主要成分是结核杆菌蛋白。②纯蛋白衍生物（purified protein derivative， PPD）。目前多用后者，常规试验是取PPD 5单位注射前臂屈侧皮内，48~72小时如红肿硬结大于5mm者为阳性。≥15mm为强阳性，对临床诊断有意义。

     结核菌素应用 ①选择卡介苗接种对象和免疫效果的测定，结核菌素试验阴性者应接种BCG；②作为婴幼儿结核病诊断的参考，小儿愈小，诊断价值愈大；③肿瘤患者等病人的细胞免疫功能测定；④在未接种过BCG的人群中调查结核病的流行情况。

四 微生物学检查

（一）标本采集

     标本的选择根据感染部位，可取痰、支气管灌洗液、尿、粪便、脓汁、胸水、腹水、脑脊液等。儿童常将痰咽下，可取洗胃液检查。经酸碱处理、浓缩集菌后进行检测。

（二）直接涂片镜检

     标本直接涂片或集菌后涂片，用抗酸性染色镜检。若找到抗酸性阳性菌，即可初步诊断。若要提高镜检的敏感性，可用金胺染色，在荧光显微镜下结核杆菌在暗的背景上显出金黄色荧光，可提高阳性率。

（三）分离培养

      将处理后的标本接种于固体培养基上，器皿口加橡皮塞于37℃培养，每周观察一次，2~4周形成肉眼可见的菌落。亦可将处理后的标本涂于无菌玻片上，干燥后置于含血清的液体培养基中，37℃培养1周，取出玻片染色镜检，可快速获得结果，并可进一步作生化、药敏等测定。

五、防治原则

（一）预防

     除进行卫生宣传教育，对结核病患者早期发现、隔离和积极治疗，防止结核病的传播外，主要是特异性预防，即接种卡介苗。目前，我国规定出生后即接种卡介苗，7岁时复种，在农村12岁时再复种一次。1岁以上应先做结核菌素试验，阴性者接种。卡介苗接种后2~3个月再作结核菌素试验，如仍为阴性说明接种失败，需再接种。接种后免疫力可维持3~5年。

（二）治疗

     抗结核药物治疗，应着重以下原则：早期发现和治疗：联合用药，彻底治愈。第一线药物有利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素。利福平与异烟肼合用可以减少耐药性的产生。

　　1.凝固酶（coagulase）：增强细菌抗吞噬细胞的吞噬作用。

　　2.葡萄球菌溶血素（staphylolysin）：能破坏多种细胞的细胞膜，故又称为溶细胞毒素。

　　3.杀白细胞素（leukocidin）：可杀伤中性粒细胞和巨噬细胞。

　　4.肠毒素（enterotoxin）：引起急性胃肠炎（食物中毒）。

　　5.表皮溶解毒素（exfoliativetoxin）：裂解表皮组织棘状颗粒层，导致表皮与真皮脱离。

　　6.毒性休克综合征毒素-1（toxicshocksyndrometoxin1，TSST-1）：抑制内毒素脱毒；刺激单核吞噬细胞释放血管活性物质。

　　7.葡萄球菌表面蛋白A（staphylococcalproteinA，SPA）：可与IgG抗体Fc段非特异性结合，竞争性抑制吞噬细胞对细菌的吞噬作用医学教育网原创。

　　二、链球菌属主要的致病物质

　　⒈链球菌溶血素（streptolysin）：链球菌溶血素O（streptolysinO，SLO），链球菌溶血素S（streptolysinS，SLS）。

　　⒉致热外毒素（pyrogenicexotoxin）：又称红疹毒素，是猩红热的主要毒性物质。

　　⒊透明质酸酶（hyaluronidase）：促进细菌扩散。

　　⒋链激酶（streptokinase）：促进细菌扩散。

　　⒌链道酶（streptodonase）：促进细菌扩散。

　　⒍M蛋白（Mprotein）：抗吞噬、引起机体变态反应。

　　⒎脂磷壁酸（leipoteichoicacid，LTA）：细胞表面有脂磷壁酸受体，与细菌细胞壁中脂磷壁酸结合，促进链球菌粘附易感细胞。

　　三、肺炎球菌属致病物质

　　1.荚膜：增强肺炎球菌抗吞噬能力。

　　2.肺炎球菌溶血素（pneumolysinO）.

　　3.紫癜形成因子：皮肤紫癜、出血。

　　四、脑膜炎奈瑟菌致病物质：

　　荚膜：增强细菌抗吞噬细胞的吞噬作用。

　　菌毛：增强细菌粘附于易感细胞的表面内毒素：引起发热及低血压性休克

　　五、淋病奈瑟菌致病物质

　　（1）荚膜：增强抗吞噬细胞吞噬。

　　（2）菌毛：粘附于易感细胞表面。

　　（3）IgA1蛋白酶：破坏粘膜表面IgA1 .

　　六、肠产毒性大肠杆菌（enterotoxigenicE.coli，ETEC）主要致病物质：肠毒素（外毒素）、菌毛

　　七、肠侵袭性大肠杆菌（enteroinvasiveE.coli，EIEC）主要致病物质：内毒素、菌毛

　　八、肠致病型大肠杆菌（enteropathogenicE.coli，EPEC）主要致病物质：内毒素、菌毛

　　九、肠出血型大肠杆菌（enterohemorrhagicE.coli，EHEC）主要致病物质：Vero毒素、溶血素、内毒素、菌毛

　　十、志贺菌属致病物质

　　1.菌毛：粘附回肠末端及结肠粘膜上皮细胞。

　　2.志贺毒素：对细胞有毒性，同时可引起腹泻。

　　3.内毒素：毒性强烈，是志贺菌主要致病物质。

　　十一、沙门菌属致病物质

　　1.Vi抗原：抗吞噬细胞吞噬作用。

　　2.肠毒素：外毒素。

　　3.内毒素：体温升高，白细胞数下降、休克。

　　十二、破伤风梭菌（C.tetani）致病物质：破伤风痉挛毒素和破伤风溶血素。

　　破伤风痉挛毒素的致病机理：作用于脊髓前角运动细胞，封闭了抑制性中间神经元释放抑制性神经介质，导致骨骼肌强直性收缩，出现破伤风特有的苦笑面容和角弓反张等临床症状。

　　十三、产气荚膜梭菌致病物质：肠毒素，增加肠壁通透性，引起腹泻。

　　α毒素：作用类似于卵磷脂酶，医学教育网原创溶解血细胞和血管内皮细胞，造成血管通透性增加，形成水肿。

　　十四、肉毒梭菌致病物质：肉毒毒素（botulin）。

　　毒素的作用机制：作用于颅脑神经核、外周神经-肌肉接头处，阻碍乙酰胆碱的释放，导致肌肉弛缓性麻痹。

　　十五、白喉棒状杆菌主要为白喉外毒素。

　　白喉外毒素是棒状杆菌β-噬菌体基因表达产物，可与人细胞表面的特异性受体结合，干扰细胞蛋白质合成。

　　十六、芽孢杆菌属（Bacillus）主要的致病物质

　　（1）荚膜：可抵抗机体吞噬细胞对细菌的吞噬作用。

　　（2）炭疽毒素：直接损伤微血管内皮细胞，增加血管通透性，血液粘稠度增高导致感染性休克及DIC.

抗菌药对细菌性传染病的控制起到了非常重要的作用，但由于盲目的滥用抗菌药，很多致病性细菌产生了耐药性，使得抗菌药对细菌性疾病的控制效果越来越差，不但造成药物浪费，而且还延误病情。随着新型致病菌的不断出现，抗菌药的防治效果越来越差。并且各种致病菌对不同的抗菌药物的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药物的敏感性也有差异。长期以来，各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药物往往失去药效，以及不能很好的掌握药物对细菌的敏感度，所以一个正确的结果，可供临床医师选用抗菌药物的参考，并提高疗效。

药敏试验分类

一、纸片扩散法

该法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面上，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，从而在纸片的周围形成浓度梯度。同时，纸片周围抑菌浓度范围内的菌株不能生长，而抑菌范围外的菌株则可以生长，从而在纸片的周围形成透明的抑菌圈，不同的抑菌药物的抑菌圈直径因受药物在琼脂中扩散速度的影响而可能不同，抑菌圈的大小可以反映测试菌对药物的敏感程度，并与该药物对测试菌的MIC呈负相关。

二、稀释法

稀释法药敏试验可用于定量测试抗菌药物对某一细菌的体外活性，分为琼脂稀释法和肉汤稀释法。实验时，抗菌药物的浓度通常经过倍比（lg2）稀释，能抑制待测菌肉眼可见生长的最低药物浓度成为最小抑菌浓度（MIC），一个特定抗菌药物的测试浓度范围应该包含能够检测细菌的解释性折点（敏感、中介和耐药）的浓度，同时也应该包含质控参考菌株的MIC。

判定标准

一、药敏实验的结果，应按抑菌圈直径大小作为判定敏感度高低的标准。

表1　药物敏感实验判定标准

抑菌圈直径（毫米）敏感度

20以上极敏

15~20 高敏

10~14 中敏

10以下低敏

0 不敏

二、药物敏感实验判定标准参考表

1，多黏菌素抑菌圈；在9毫米以上为高敏，6—9毫米为低敏，无抑菌圈为不敏。

影响药敏结果的因素

一、培养基：应根据试验菌的营养需要进行配制。倾注平板时，厚度合适（约5-6mm），不可太薄，一般90mm直径的培养皿，倾注培养基18-20ml为宜。培养基内应尽量避免有抗菌药物的拮抗物质，如钙、镁离子能减低氨基糖苷类的抗菌活性，胸腺嘧啶核苷和对氨苯甲酸（PABA）能拮抗磺胺药和TMP的活性。

二、细菌接种量：细菌接种量应恒定，如太多，抑菌圈变小，能产酶的菌株更可破坏药物的抗菌活性。

三、药物浓度：药物的浓度和总量直接影响抑菌试验的结果，需精确配制。商品药应严格按照其推荐治疗量配制。

四、培养时间：一般培养温度和时间为37℃ 8-18小时，有些抗菌药扩散慢如多粘菌素，可将已放好抗菌药的平板培养基，先置4℃冰箱内2~4小时，使抗菌药预扩散，然后再放37℃温箱中培养，可以推迟细菌的生长，而得到较大的抑菌圈。

药敏试验的应用

 药物敏感实验后，应选择高敏药物进行治疗，也可选用两种药物协助使用，以减少耐药菌株。在选择高敏药物时应考虑药物的吸收途径，因为我们药敏实验是药液直接和细菌接触，而在给药的时候，必须通过机体的吸收才能使药物达到一定的效果，所以在给药时，高敏药物一定要配合适宜的给药方法，这样才会达到好的治疗效果。

• 采用高灵敏的荧光增强法全自动连续监测，检出速度快、准确性高；
• 检出时间短，阳性标本平均检出时间9.65小时
• 超过30种运算法则适应各种临床样本，二期运算法则和延迟放瓶运算法则防止漏检；
• 提供多种培养瓶满足各种样本需求
• 树脂培养瓶完美吸附抗生素，提高阳性检出率避免假阴性
• 人体工学设计，简化操作流程，节约实验室空间
• 可配套使用真空采血系统，有效防止污染和针刺伤害，提高对操作人员的安全防护。

（一）采血指征

　对入院的危重病人未进行系统性抗生素治疗时，应及时进行血液培养，病人出现以下临床表现时可作为采集血培养的重要指征。　

　1.发热（》38℃）或低温（《36℃）　

　2.寒战　

　3.白细胞增多（>10×10^9/L，特别有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多）　

　4.粒细胞减少（成熟的多核白细胞<1×10^9/L）　

　5.血小板减少　

　6.皮肤、粘膜出血　

　7.昏迷　

　8.多器官衰竭　

　9.血压降低　　

  10.呼吸加快　　

 或同时具备上述几种临床表现时应采集血培养。在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应该增加尿液和脑脊液培养。肺炎链球菌与流感嗜血杆菌菌血症患儿（特别是2岁或2岁以下的幼儿）一般在门诊就诊，常伴有明显发热（》38.5℃）和白细胞增多（》20×10^9/L）。老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎的重要指征。

（二）消毒程序

要点：防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题。由污染菌引起的假阳性增加了病人抗生素的使用量。然而，在理想的消毒条件下，仍有3%-5%血培养中混有污染菌，它们来源于皮肤（表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、梭杆菌属、类白喉群）或环境（革兰阳性芽孢杆菌属、不动杆菌属），故进行血培养阳性统计处理时，通过将单次血培养生长革兰阳性芽孢杆菌属、棒状杆菌属、痤疮丙酸杆菌或凝固酶阴性葡萄球菌的标本视为污染，一次血培养的阳性瓶数对区分真正的病原菌和污染菌无太大帮助。　　皮肤消毒：血培养为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂[碘酊或聚维酮碘(碘伏)]对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地降低皮肤污染。　　培养瓶消毒：用70%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子；酒精作用待60S；在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液。

（三）采血量和血培养的数量

采血量：对从菌血症或真菌菌血症病人血培养中获得的微生物，每个培养瓶抽取的血量是唯一重要的变量。对婴幼儿和儿童，一般采血1~5ml用于血培养。成人血培养的标本量为10ml，血液和肉汤比一般推荐为1:5~10。　　血培养的数量：血培养的数量和采血时间关系到菌血症的病理生理学，一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养。一般而言，采集血培养都应该在使用抗生素之前进行，推荐同时采集2~3份血。

临床诊断

血培养是临床诊断败血症的重要方法,阳性结果对明确诊断、对症治疗有极高的应用价值。但据文献报道目前国内的血培养阳性率仅为17。8%和18.4%。为了提高血培养的阳性率,客观的反映出败血症患者血内存在病原菌的实际状况,临床医生精确选用血培养,检验科室精心分离鉴定.

血培养是把静脉穿刺获得的血液接种到一个或多个培养瓶或培养管中，用来发现、识别细菌或其它可培养分离的微生物（如大肠杆菌、念珠菌属、霉菌属等），这些微生物存在于血液中形成菌血症或真菌菌血症。在病人的血液中检测出微生物对感染性疾病的诊断、治疗和预后有重要的临床意义。当细菌或真菌在血液中迅速繁殖超出单核吞噬细胞系统清除这些微生物的能力时，即产生持续的菌血症，并且可感染血管外组织。病原微生物从血管外经淋巴管直接进入血流，病人可发生血管内感染（如感染性心内膜炎、真菌性动脉瘤、化脓性静脉炎、感染性动脉瘘和动静脉管炎）。除多处感染或动脉内有感染灶外，大量涌入血流的细菌能在几分钟至数小时内被全部清除，肝和脾脏中的巨噬细胞对清除血流内的细菌起着重要的作用，特异性抗体有促清除作用，多形核白细胞在控制血管外局部感染中起重要作用，血管内的中性粒细胞也有一定清除微生物的作用。但细菌的荚膜和毒力因子却阻碍了清除作用的进行。

了解引起菌血症的不同途径有助于诊断和解释血培养结果。菌血症通常来源于以下部位的感染，其中泌尿生殖道为25%，呼吸道为20%，脓肿为10%，外科伤口为5%，胆道感染为5%，其他已知部位的感染为10%，未知部位的感染为25%。

菌血症的临床类型

1.一过性菌血症（transientbactermia）：常发生在病人接受抗生素系统治疗且感染的微生物敏感，由条件致病菌引起，可能造成严重的后果。一过性菌血症发生于治疗初期是由于抗生素的血药浓度不当，发生于治疗晚期是感染部位引流不当或宿主防御功能破坏。常发生于对感染组织（如脓肿、疖、蜂窝组织炎）的处理、污染粘膜表面的创伤性操作（牙齿修复、膀胱镜检、尿道扩张术及各种插管、引产和乙状结肠镜检查）和污染区的外科手术（经尿道的前列腺切除、阴道子宫切除术和烧伤感染的清创术）。一过性菌血症亦可发生在全身或局部感染的早期。据文献报道，脑膜炎、肺炎、化脓性关节炎、骨髓炎、腹膜炎、胆囊炎、小肠结肠炎、外伤或手术感染均可能引发一过性菌血症。

2.持续性菌血症（continuousbacteremia）是感染性心内膜炎、感染性动脉瘤、血栓性静脉炎和其他血管内膜感染的主要特征，亦可发生在伤寒热和波浪热的最初几周。

3.间歇性菌血症（intermittentbacteremia）常发生于腹腔、骨盆、肾周、肝脏、前列腺及其他部位未能及时引流的脓肿，这些脓肿是不明发热的常见原因。

1单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)　

属疱疹病毒科，含线性双链DNA分子。1966年Naib等发现 HSV-2感染后宫颈癌变的发病率增高，Nahmias追踪了1～6年发现，疱疹病毒感染患者的宫颈 不典型增生和原位癌发病率分别是对照组的2倍和8倍。一些患者血清中能检测到抗HSV-2 肿瘤相关抗原抗体，抗HSV-2 VP B4抗体，在宫颈癌细胞中已找到HSV-2抗原，宫颈癌患者 血清中HSV-2的AG-4抗体阳性检出率与治疗效果呈正相关，效果好者阳性率下降，而复发者阳性率上升，HSV-2可引起培养细胞染色体畸变，已制成HSV-2诱发宫颈癌的动物模型，并从宫 颈癌组织中分离出HSV-2 DNA和mRNA，但尚不能完全证实HSV-2是宫颈癌的直接致瘤病毒。

2 EB病毒(EBV)　

是一种DNA病毒，EBV与多种人类肿瘤有关，Labrecque等首次报道EBV 与 乳腺癌的关系，用PCR方法研究91例乳腺癌EBV-DNA，19例(21%)阳性，21例乳腺良性肿瘤及 正常乳腺均阴性，我国学者用PCR技术检测82例乳腺癌EBV，发现30.5%的乳腺 癌 组织中有EBV DNA整合。郭丰等用PCR方法对40例宫颈癌的EB病毒感染检测，发现29例有EB病 毒感染(72.5%)。

Epstein-Barr病毒（EBV）EB病毒与伯基特淋巴瘤和鼻咽癌等肿瘤有关。其主要感染人类口咽部上皮细胞和B细胞。EBV能使B细胞发生多克隆性增殖。在此基础上再发生其它突变，如N-ras突变，发展为单克隆增殖，形成淋巴瘤。鼻咽癌在我国南方和东南亚多见，肿瘤中有EBV基因组。

3巨细胞病毒(CMV)　

是Β疱疹病毒亚种，基因组为线状双链DNA分子，研究发现CMV能 促 进细胞DNA和RNA合成，改变细胞代谢，具有潜在的致癌作用。最近认为它与宫颈癌发生有关 ，主 要依据是：CMV可通过性接触传播引起生殖道隐性感染；在体外可转化培养细胞；宫颈、 皮垢和晚期宫颈癌组织中分离到CMV颗粒；宫颈癌患者血清中CMV抗体高度增加，且在宫颈癌 细胞内查出了CMV DNA。