酶标仪单双波长对于检测结果的影响--天津华裕生物科技有限公司
   
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酶标仪单双波长对于检测结果的影响
[ 2010-2-22 14:32:00 | By: 华裕 ]
 

天津华裕生物科技有限公司是专业代理销售国外知名公司诊断试剂和仪器的专业公司,是国外知名企业CANAGVIRION-SERIONIMTECINVERNESS等的代理商。

公司成立以来,秉承产品一流,服务专业的宗旨,在提供优质产品的同时,致力于公司自身的建设,拥有了一支专业化的销售队伍,建立了完善的企业售后服务体系,能够为客户提供强力的技术支持和各项服务,得到客户的广泛认可。客户第一,服务至上是公司始终不渝的发展理念;让客户满意在华裕是公司追求的最高目标。

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Tianjin Huayu Bioresearch Co.,Ltd.

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 酶标仪单双波长对于检测结果的影响

 

1、酶标仪与分光光度计、生化分析仪吸光度测定虽然原理相同,都使用郎伯一比耳定律,但分光光度计及生化分析仪均是水平光路测定样本吸光度,而酶标仪是垂直光路测定吸光度。垂直光的特点是样本吸光度受液体浓缩或稀释的影响小,不足之处是易受被测样本液面是否水平,酶标板透光性孔底是否平整等的影响较大。

2、酶标仪在使用单波长测定吸光度时,除受到样本浊度、干扰色和机器噪音、漂移、电压等于扰因素外,受液体表面张力的影响也很大。在检测过程中,由于液体表面张力作用,液体表面不是水平面,而形成一个凹面,不可避免影响光的正常通过。由于凹面的影响,光线通过液体时,除正常被液体吸收一部分外,部分光被折射和反射,影响吸光度检测。而酶标仪又是通过光导纤维传播的点光源,由于机械运动等造成不能在每孔同一部位检测,孔与孔之间有一定差异,使吸光度的重复性得不到保证,而产生误差。表1表明,整板单波长检测的CV3以上,吸光度最大值和最小值相对误差在15以上。

3、在双波长测定中,减少了测定干扰和电路干扰,测定结果明显好转,整板检测的CV2以下。不同洗涤剂会影响到最后加入底物和终止液后的液面情况,用加入表面活性剂的洗涤液清洗后,液面更凹,对单波长检测影响更大,与表面活性剂的浓度呈正比。而用中性蒸馏水洗涤后,单、双波长检测的结果基本一致。

4、在酶免测定抗原抗体过程中,由于使用的底物邻苯二胺(OPD)3355'-四甲基联苯胺(TMB)3显色终止后,在630nm处的吸光度只有吸收峰450nm处的1以下,所以,使用双波长不会影响检测灵敏度。

综上所述,在酶联免疫检测中,酶标仪比色时应首选双波长,这样可以提高临界值处样本的分析准确度,减小实验误差。

 

 

 
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